免疫组化保证性抗体制备

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服务号：

ABF5101

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￥0.00

服务周期：

服务分类：

特殊功能抗体制备

免疫组化（IHC）实验是一种综合定性、定位和定量，形态、机能和代谢密切结合为一体的研究和检测技术。在原位检测目的分子的同时，还能观察到组织并便于病原的关系，确认受染细胞类型，从而有助于了解疾病的发病机理和病理过程。由于样本在与抗体孵育前要经历固定、包埋、切片、修复等多种试验处理，经历的理化环境对于抗原有较大的破坏性，因此该类实验所用到的抗体的要求较ELISA、WB等试验所用抗体更高，因此长期以来，IHC保真型抗体一直是抗体制备中具有较高难度的风险项目。

艾柏森生物依托资深地分子实验技术团队，建立起IHC保真性抗体制备的整套服务，在获得大量疑似阳性杂交瘤细胞后，可以为客户代劳验证IHC可用性抗体，并交付验证后的杂交瘤细胞上清纯化抗体给客户进一步验证，这一方面大为节省了客户的精力，缩短试验周期，同时也排除了试用样品运输风险带来的假阳性问题。目前除了提供IHC验证服务，本公司也面向广大科研与医疗单位，提供IHC实验外包承接服务。能根据客户的需求，完成从组织包埋、切片、染色、拍片和阅片等整个实验服务流程。

服务组合

服务项目(Service Items)		周期（月）Time (months)	客户提供(Start point)
服务项目(Service Items)		周期（月）Time (months)	多肽peptide	小分子 Molecular	磷酸基/甲基/乙基化多肽 Phosphate/Methyl/acetyl-specific	纯化蛋白 purified protein	原核表达质粒Expression plasmid	原核蛋白从头制备Prokaryotic proteins synthesis de novo	真核蛋白从头制备 Eukaryotic proteins synthesis de novo
多肽设计与合成 Peptide design & synthesis	多肽设计 Peptide design	0.5	可选，免费
	多肽合成 Peptide synthesis		√		√
	小分子或多肽偶联 conjugation		√	√	√
蛋白制备proteins preparation	cDNA合成 cDNA synthesis	1						另议，时间与价格均不包含在以下信息中	另议，时间与价格均不包含在以下信息中
	载体构建 Vector construction							√	√
	蛋白表达与纯化 Protein expression & purification						√	√	√
免疫阶段Immunization	免疫小鼠5只 Immunized 5 mice	1.5	√	√	√	√	√	√	√
	ELISA检测 Elisa detection	1.5	√	√	√	√	√	√	√
细胞融合与筛选 Fusion & Screening			1.5	√	√	√	√	√	√	√
亚克隆阶段（ELISA效价检测初筛）Subcloning（ELISA Screenig)		0.5	√	√	√	√	√	√	√
单克隆阶段（IHC 检测初筛） Monocloning (IHC Screening)		1	√	√	√	√	√	√	√
腹水生产（3只小鼠） Ascites production (Injection on 3 mice)		1	√	√	√	√	√	√	√
纯化与检测 Purification and detection	亲和纯化 Affinity purification	0.5	√	√	√	√	√	√	√
纯化与检测 Purification and detection	特异性亲和纯化 Antigen specific affinity purification	0.5
总周期（月） Total lead time(months)			3~5			~3	3~5	4~6	4~6

经典案例

客户：提供蛋白抗原\质粒\蛋白信息+20张抗原阳性石蜡切片（3~5μm厚度）

制备流程：

1）抗原制备\质粒表达蛋白纯化\多肽设计合成及交联

2）免疫小鼠：免疫Balb/c小鼠5~6只

3）ELISA/Western-blot试验监控小鼠血清中的抗体效价和特异性，根据ELISA和WB检测，筛选小鼠

4）细胞融合：使用美国ATCC引进并优选后的骨髓瘤细胞SP2/0进行融合

5）阳性筛选：对杂交瘤上清进行ELISA检测，筛选出抗体阳性的杂交瘤细胞克隆

6）亚克隆：阳性克隆通过有限稀释法进行亚克隆，如客户需要，可选10~20个单克隆上清给客户检测。可根据客户的要求选择合适的单克隆细胞株进行生产，并坚定分泌的抗体Ig的亚型（费用另计）。

7）IHC实验筛选阳性克隆3株，并纯化细胞上清给客户验证

8）腹水制备：采用小鼠腹腔接种法进行杂交瘤培养物的腹水生产

9）抗体纯化：纯化2株单克隆杂交瘤细胞分泌抗体

交付产品（每种抗原、5只小鼠一共的）

1）5mg多肽

2）2个针对免疫原特异性的单克隆杂交瘤细胞株

3）每个细胞株各提供10ml（1mg/ml）纯化的抗体，Elisa效价应至少1:50,000以上；WB内源检测阳性

4）如果客户需要可以提供：制备的腹水（效价1:500~1000，费用另计），杂交瘤细胞培养上清（WB用原液）

5）剩余的抗原，完整的多肽合成、偶联质检报告、IHC实验验证检测报告

制备时间：4.5个月

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