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膜蛋白抗体制备服务

服务号:

ABF5107

目录价:

¥0.00

服务周期:

服务分类:

特殊功能抗体制备

对于绝大多数的可溶性蛋白抗原,我们可以制备全长的蛋白抗原以免疫动物制备抗体,但是对于那些依托双脂层膜结构建立起来的多次跨膜蛋白,抗体的制备就没那么简单了。比如G蛋白偶联受体(GPCR)蛋白就是一个典型的大型、多次跨膜的重要蛋白家族,它是许多疾病的病理信号参与者,同时也是近一半现代药物的作用靶点。然而要想制备GPCR的抗体确实非常困难,这主要有两方面因素造成,一是众多的跨膜区间造成蛋白的一级结构被分割成彼此间隔在细胞膜内外两侧的多个区域,而人为去掉这些结构则会造成蛋白构象丧失原有形态;二是表达量极低,由于作为膜通道,在细胞信号转导中发挥关键作用,人为过表达外源的GPCR,会导致细胞信号紊乱,极易造成细胞死亡,所以我们很难制备得到采用全蛋白所需的最少蛋白计量。


艾伯森生物通过多年的项目实践经验,积累了数种多次跨膜蛋白抗体制备方法,包括经典的可溶区蛋白设计方案,重组蛋白免疫方案,以及公司技术人员开发的基于全细胞免疫的抗体制备方案,以最小的试验风险,获得最优品质的抗体,为客户量身打造最佳的抗体制备思路。


服务组合

服务项目(Service Items)

周期

(月)Time

(months)

客户提供(Start point)

多肽方案 Peptide Immunization

重组蛋白方案 Recombination Protein Immunization

全细胞免疫方案 Whole Cell Immunization

多肽设计与合成 Peptide design & synthesis

多肽设计  

 Peptide design

~2

可选,免费





       多肽合成        

Peptide synthesis





小分子或多肽偶联

 conjugation





蛋白制备proteins preparation

cDNA合成 

cDNA synthesis

6~8




载体构建

Vector construction




蛋白表达与纯化  

Protein expression

& purification




免疫阶段Immunization

免疫5只小鼠/2只兔子 

 Immunized 5 mice/2 rabbits

~8 

       ELISA检测      

Elisa detection

细胞融合与筛选

Fusion & Screening

1.5

 


 

亚克隆阶段subcloning

1 

 

 

 

腹水生产(5只小鼠)

 Ascites production

 (Injection on 5 mice)

1

 

 

 

纯化与检测

Purification and detection

 标签纯化   

Lable tag affinity purification

~1 


 

亲和纯化 

 Affinity purification



特异性亲和纯化

 Antigen specific affinity purification 







   总周期(月) 

Total lead time(months)

3~5

3~5

4~6

4~6


经典案例(两次跨膜蛋白抗体制备 Twice Transmembrane antibody service)

客户:提供蛋白信息

制备流程:

1、蛋白结构分析,重组蛋白设计与密码子优化

2、基因合成、载体构建与蛋白表达

3、饲养、免疫两只兔子/抗原(免疫三次3周)

4、取血、Elisa检测(与免疫同步进行)

5、纯化检测交货

交付产品(每种抗原、2只兔子一共的)

1)3~5mL阴性血清

2)15~20mL阳性血清,ELISA效价一般在1:60,000以上

3)完整的多肽合成质检报告,抗体纯化实验报告、剩余的抗原。

制备时间:3~4个月


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