服务号: |
ABF5011 | 目录价: |
¥0.00 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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服务分类: |
单克隆抗体制备 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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服务项目(Service Items) |
周期 (月)Time (months) |
客户提供(Start point) |
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多肽peptide |
小分子 Molecular |
磷酸基/甲基/乙基化多肽 |
纯化蛋白 purified protein |
原核 表达质粒Expression plasmid |
原核蛋白从头制备Prokaryotic proteins synthesis de novo |
真核蛋白从头制备 |
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多肽设计与合成 Peptide design & synthesis |
多肽设计 Peptide design |
0.5 |
可选,免费 |
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多肽合成 Peptide synthesis |
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小分子或多肽偶联 conjugation |
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蛋白制备proteins preparation |
cDNA合成 cDNA synthesis |
1 |
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另议,时间与价格均不包含在以下信息中 |
另议,时间与价格均不包含在以下信息中 |
载体构建 Vector construction |
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蛋白表达与纯化 Protein expression & purification |
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免疫阶段Immunization |
免疫仓鼠(3~5只) Immunized 3~5 hamsters |
1.5 |
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ELISA检测 Elisa detection |
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细胞融合与筛选 Fusion & Screening |
1.5 |
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亚克隆阶段subcloning |
0.5 |
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腹水生产(5只仓鼠) Ascites production (Injection on 5 hamsters) |
1 |
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纯化与检测 Purification and detection |
亲和纯化 Affinity purification |
0.5 |
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特异性亲和纯化 Antigen specific affinity purification |
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总周期(月) Total lead time(months) |
3~5 |
~3 |
3~5 |
4~6 |
4~6 |
注:
1) 1) 仓鼠源抗体与小鼠源抗体具有较高的序列相似性,这些相似序列主要集中在抗体的Fc段,因此如果为了避免与小鼠源抗体的交叉反应,仓鼠源抗体使用时还应与专一性识别仓鼠源的二抗结合使用;
2) 仓鼠源抗体对抗原的识别专一性优于小鼠源,次于人源;
3) 由于受试动物较为脆弱,制备工艺复杂,为防止实验意外,本公司仓鼠单抗制备免疫数量一般最少5只;
4) 所有受试动物均为SPF级高质量环境饲养,所以严禁使用病原性、未灭活免疫原,如因客户蓄意隐瞒抗原性质问题,造成我司重大经济损失,我司保留法律追究权利,因此请各位客户务必配合我们的工作,如实告诉我们抗原性质。
经典案例:仓鼠源单克隆抗体定制服务(Hamster Hybridoma Production)
客户:提供蛋白抗原\质粒\蛋白信息
制备流程:
1)抗原制备\质粒表达蛋白纯化\多肽设计合成及交联
2)免疫仓鼠:免疫叙利亚仓鼠5只
3)ELISA/Western-blot试验监控小鼠血清中的抗体效价和特异性,根据ELISA和WB检测,筛选小鼠
4)细胞融合:使用美国ATCC引进并优选后的骨髓瘤细胞SP2/0进行融合
5)阳性筛选:对杂交瘤上清进行ELISA检测,筛选出抗体阳性的杂交瘤细胞克隆
6)亚克隆:阳性克隆通过有限稀释法进行亚克隆,如客户需要,可选10~20个单克隆上清给客户检测。可根据客户的要求选择合适的单克隆细胞株进行生产,并坚定分泌的抗体Ig的亚型(费用另计)。
7)腹水制备:采用小鼠腹腔接种法进行杂交瘤培养物的腹水生产
8)抗体纯化:纯化2株单克隆杂交瘤细胞分泌抗体
交付产品(每种抗原、5只小鼠一共的)
1)1~2株针对免疫原特异性的单克隆杂交瘤细胞株
2)每个细胞株各提供10ml(1mg/ml)纯化的抗体,Elisa效价应至少1:50,000以上;WB内源检测阳性
3)剩余的抗原,完整的实验报告
制备时间:3~6个月
4)
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