miRNA的检测
Real-time PCR方法克服了由于miRNA分子太短(~22 nt)带来的定量最大难题而引入靶向特异性的反转录引物,该RT引物可以与成熟miRNA结合,形成反转录引物/成熟miRNA复合物,并在miRNA的5’末端延伸。这样就得到一个较长的反转录扩增因子,为进一步做实时定量PCR提供了符合要求的摸板。
检测流程与原理:
提供样品:
请提供新鲜且足量的样本,组织>100~200 mg,RNA模板/DNA模板>5 μg;
提供信息:
待测miRNA名称;详细的背景资料:样本来源、丰度、相关文献等;
☀交付成品:
设计合成的荧光标记引物探针等实验材料;
☀交付报告:
详细的实验步骤、完整的实验报告、标准曲线、扩增曲线、溶解曲线、软件分析结果。