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基因组步移
基因步移TAIL-PCR法
TAIL-PCR（thermal asymmetric interlaced PCR），即交错式热不对称PCR，该技术根据已知 DNA 序列，分别设计三条同向且退火温度较高的特异性引物（SP Primer），与经过独特设计的退火温度较低的兼并引物（可以设计多条，AP1、AP2、AP3……）， 进行热不对称 PCR 反应。通常情况下，其中至少有一种兼并引物可以与特异性引物之间利用退火温度的差异进行热不对称 PCR 反应，一般通过三次巢式 PCR 反应即可获取已知序列的侧翼序列。如果一次实验获取的长度不能满足实验要求时，还可以根据第一次步移获取的序列信息，继续进行侧翼序列获取。
基因步移内切酶法
内切酶法则是将基因组DNA通过酶切之后，在DNA片段两端加上接头，利用接头引物（可以设计多条，AP1、AP2、AP3……）与根据已知DNA序列所设计的2~3条特异性引物（可以设计多条，GSP1、2、3……）进行2~3轮巢式PCR以获取已知序列的侧翼序列。如果一次实验获取的长度不能满足实验要求时，还可以根据第一次步移获取的序列信息，继续进行侧翼序列获取。
♣交付成品：
不少于1μg的包含目的基因的质粒一份；含上述质粒的甘油菌株一份；测序引物； 如产生克隆测序，提供测序用的质粒；
♣交付报告：
实验报告、PCR 产物照片、测序结果。
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