从新鲜组织、血液、细胞、细菌等多种材料中提取基因组DNA,不同种类的材料中可获得的基因组DNA量不同,因而差异也比较大,一般材料的基因组DNA得率如下表:
材料种类 |
样品要求 |
超始量 |
产物量 |
血液 |
新鲜血液及抗凝剂处理的全血 |
250μL |
1μg |
培养细胞 |
离心收集的细胞 |
1×106 |
10μg左右 |
动物组织 |
一般材料 |
100 mg |
5~10μg |
植物 |
一般材料 |
100 mg |
5~10μg |
细菌 |
菌悬液或离心收集的菌体 |
1×108 |
1~2 μg |
特殊样本(石蜡、 水样、淤泥等) |
具体材料需进行具体条件摸索 |
客户提供 |
由样品量决定 |
细菌、细胞样品需要新鲜培养;动物组织、植物组织等样品取样后需液氮速冻;
用于提取基因组DNA的血液样品最好使用肝素抗凝,而不要使用EDTA,因为EDTA会螯合二价离子(Mg2+),而影响后续实验(如反转录、PCR等);可在4℃下可保存一周,-20℃下可保存1个月;
待提取样品最好使用干冰运输;
交付成品:
实验获取的基因组DNA样品(溶于无菌水或TE等buffer请备注);
交付报告:
完整的实验报告:电泳照片、OD值测定结果等。