基于全细胞抗原呈递的抗体制备方案

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ABF5112

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特殊性质抗原抗体制备

在哺乳动物的免疫起始步骤，抗原都不是直接由Th细胞处理的，而是由抗原呈递细胞（APC）来完成抗原的加工与呈递的。如果我们能制备表达目的抗原的细胞，那么这些抗原将在此细胞表面大量表达，类似于APC一样使其表面带有抗原决定簇，那么这个细胞就可以用来作为抗原免疫动物。

该方案的优点是：真核系统原位表达跨膜蛋白，保证了其完整的翻译后修饰加工过程，同时由于以细胞膜作为组装展示面，其天然的结构特征得以很好地保留下来；

该方案的缺点是：由于细胞体积相对于目的抗原过于庞大，同时表面具有一定非目的抗原的修饰，所以其作为抗原，虽然免疫原性可以保证，但是有效性和专一性却很难保证，解决这一问题的方法包括高效表达目的抗原以及需要后期的大量筛选来证实和排除识别无效抗原的抗体。

服务项目 (Service Items)		周期（周） Time(weeks)	全细胞免疫方案 Whole Cell Immunization
蛋白制备 proteins preparation	cDNA合成 cDNA synthesis	6~8	√	√
	载体构建 Vector construction		√	√
	蛋白表达与纯化 Protein expression & purification		√	√
免疫阶段 Immunization	免疫2只兔子 Immunized 2 rabbits	~8	√
	免疫5只小鼠 Immunized 5 mice			√
	ELISA检测 Elisa detection		√	√
细胞融合与筛选 Fusion & Screening		1.5		√
亚克隆阶段 subcloning		1		√
腹水生产（5只小鼠） Ascites production (Injection on 5 mice)		1		√
纯化与检测 Purification and detection	标签纯化 Lable tag affinity purification	~1	√	√
	亲和纯化 Affinity purification		√
	特异性亲和纯化 Antigen specific affinity purification			√
总周期（月） Total lead time(months)			4~6	6~8

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