哺乳动物细胞蛋白表达纯化

服务号：

ABF4003

目录价：

￥8500.00

服务周期：

6-8周

服务分类：

哺乳动物细胞蛋白表达纯化

哺乳动物细胞表达系统的优势

1. 1. 能实现翻译后修饰及正确的蛋白折叠复性；

2. 2. 表达水平高；

3. 3. 高效启动子控制蛋白表达

4. 4. 适合大规模蛋白表达。

艾柏森生物哺乳表达系统

艾柏森生物提供表达载体构建、瞬时转染、表达测试及大规模动物细胞发酵和蛋白纯化等一站式蛋白技术服务。

表达方式	细胞
瞬时表达	HEK293，HEK293细胞来源于293细胞系，采用无血清悬浮培养；CHO-S细胞是来自中国仓鼠卵巢（CHO K1)细胞的克隆分离株，被训化为无血清悬浮培养。
稳定表达	CHO-S，CHO-K1由CHO衍生而来，该细胞株培养条件简单、贴壁强度适中，比较容易转染
稳定细胞株构建	DG44细胞（二氢叶酸还原酶缺陷型，DHFR-）由中国仓鼠卵巢（CHO）细胞衍生而来，常用于构建适合重组蛋白生产的细胞系。DG44细胞筛选和共扩增标记是DHFR基因。

表达载体：pcDNA 3.1，pIRES，pTT3，pCEP4，pATX1等常规载体以及我司分子技术人员自行合成与后期改造的专利性载体。

1. 载体构建及改进

1) 可将cDNA克隆至客户或艾伯森生物提供的哺乳细胞的表达载体中；

2) 可在表达载体中添加分泌信号肽和纯化标签，促进蛋白分泌表达及满足一步亲和纯化的需求；

3) 能生产并鉴定高效稳定细胞系，适合大规模发酵生产。

2. 稳定基因表达符合长期生存需求。整个实验操作流程提供长期稳定及规模可调的蛋白生产

3. 瞬时表达（TGE）

1) 与稳定基因表达相比，TGE主要适用于短期内制备重组蛋白，一般在10天内即可快速转染，无需质粒DNA的遗传性选择

2) 艾柏森生物的瞬时表达使用悬浮细胞，能够完成体积到100L的蛋白表达。

4. 工艺过程开发及扩大规模。艾柏森生物能够优化表达过程以及表达产物，检测细胞表达量，摸索发酵罐发酵条件，适合大规模发酵生产。

5. 纯化。艾伯森生物拥有完整的蛋白纯化系统，亲和纯化，凝胶过滤，离子交换及疏水层析等纯化方法，能够完成带标签与不带标签蛋白的纯化，以及纯化工艺的摸索。

服务列表

4.1.4 哺乳动物细胞蛋白表达纯化ABF4003
	项目服务名称		服务编号
	293细胞哺乳表达系统		ABF4003
步骤	服务内容	服务描述	价格	周期
1	密码子优化，基因合成	针对蛋白信息，技术人员进行结构预测分析，风险评估，方案制作；采用三密码子或多样三密码子规则，优化密码子序列，验证蛋白的序列氨基酸种类和比例，并进行基因合成，避免移码突变。	1.50/bp	2~3周
2	亚克隆	利用PCR、胶回收、等技术手段将目的蛋白的基因导入适合载体中，构建稳定质粒	500	3~5天
3	表达纯化测试	在不同条件下试表达质粒（优化条件包括表达温度，诱导剂浓度，表达质粒种类等等）；最后选取最优克隆+最优表达条件80ml培养液小型培养测试；交付蛋白样品	4500	5~7周
4	1L放大与纯化	根据上述表达纯化测试中筛选出的优质条件；	3500	1~2周
5	干冰运输样品	免费运输	0
6	实验报告	根据客户需要提供细节；或者根据需求定制蛋白质控服务；	0	1天
	合计		8500（不含基因合成）	8~13周