昆虫杆状病毒系统蛋白表达纯化

服务号：

ABF4002

目录价：

￥17500.00

服务周期：

8-13周

服务分类：

昆虫杆状病毒系统蛋白表达纯化

昆虫杆状病毒表达载体系统(BEVS)是一种利用杆状病毒作为外源基因的载体，通过感染昆虫细胞或者昆虫幼虫来表达外源蛋白的系统，是重要的真核表达系统之一。

1. 昆虫杆状病毒表达系统的优势

1) 杆状病毒安全性能好

2) 携带外源基因的容量大

3) 外源目的蛋白质表达水平高

4) 表达的真核基因产品可以进行正确的折叠与修饰，因而具有很好的生物活性

2. 与哺乳细胞相比昆虫表达系统的优势

1) 培养条件相对简单，不需要通过CO2

2) 培养成本相对合理

3) 不容易被细菌污染

4) 得到的蛋白含量高

1. 本公司利用经典Bac-to-Bac技术，打造了一个快速简便高效的杆状病毒表达平台。该技术能够快速地产生重组病毒，而且不需要繁琐的空斑分析，大大提高了效率。

2. 蛋白生产的周期短，通量大。可以实现细胞从小规模培养到大规模发酵的过程，使得蛋白产物甚至可以达到50mg的级别。

3. 提供免费的病毒离子扩增和储存服务，储存期长达半年。

常见的表达载体及特征

Vector	Features
pFastBac1	Strong AcMNPV polyhedrin(PH) promoter for high level protein expression Large multiple cloning site for simplified cloning
pFastBacHT	Strong polyhedrin(PH) promoter for high-level protein expression N-terminal 6His tag for purification of recombinant fusion protein using metalchelating resin and aTEV protease cleavage site for removal of the 6His tag following protein purification Vector supplied in 3 reading frames for simplified cloning
pFastVacDual	Two strong baculovirus promoters(PH and p10) to allow simultaneous expression of two proteins Two large multiple cloning sites for simplified cloning

细胞	来源	用途
Sf9	Sf9细胞系克隆分IPLBSF21-AE（Sf21），来源于秋蝇蠕虫（草地夜蛾）蛹的卵巢组织	适于转染、纯化、生产高滴度病毒、铺板以及表达重组蛋白
Sf21	Sf21细胞衍生于IPLBSF-21细胞系，也来源于秋蝇蠕虫（草地夜蛾）蛹的卵巢组织	也适于转染、纯化、生产高滴度病毒、铺板以及表达重组蛋白。在一些结构上Sf21细胞细胞可能比Sf9细胞表达蛋白量高
Hi5	Hi5细胞系源于博伊斯汤普森研究所对植物的研究，伊萨卡、纽约和源于白菜尺蠖卵巢细胞，粉纹夜蛾细胞	Hi5细胞表达重组病毒性能优越。也经常用于转染和空斑纯化，并且Hi5细胞系更适合表达分泌性重组蛋白
S2	S2是一种果蝇晚期胚胎细胞。其中多为雌性四倍体细胞，也有双倍体细胞	比较适合重组蛋白的表达

服务列表

4.1.3 昆虫杆状病毒系统蛋白表达纯化ABF4002
	服务项目名称		服务编号
	昆虫表达系统		ABF4002
步骤	服务内容	服务描述	价格	周期
1	密码子优化，基因合成	针对蛋白信息，技术人员进行结构预测分析，风险评估，方案制作；采用三密码子或多样三密码子规则，优化密码子序列，验证蛋白的序列氨基酸种类和比例，并进行基因合成，避免移码突变。	1.50/bp	2~3周
2	亚克隆	利用PCR、胶回收、等技术手段将目的蛋白的基因导入适合载体中，构建稳定质粒	500	3~5天
3	P1代病毒生产及表达测试	质粒转化，菌生长，蓝白斑，提质粒，转染，P1表达测试，SDS分析和/或WB分析	4500	2-3周
	P2代病毒生产及表达条件优化	P2病毒生产，MOI测试，SDS分析和/或WB分析	3500	2-3周
	表达纯化测试及蛋白样品交付	最优克隆+最优表达条件200ml培养液小型培养测试；交付蛋白样品	3500	1周
4	1L放大与纯化	根据纯化测试、表达测试中最适条件，大型表达蛋白。	5500	1~2周
5	干冰运输样品	免费运输	0
6	实验报告	根据顾客需求提供全程细节，包括检测中生成的SDS-PAGE等各种实验结果；可根据客户需求定制各种质控服务。	0	1天
	合计		17500（不含基因合成）	8~13周