转录后特殊修饰结构识别抗体制备

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服务号：

ABF5102

目录价：

￥0.00

服务周期：

服务分类：

特殊功能抗体制备

真核生物有着复杂的转录后修饰加工过程，如糖基化，甲基化，磷酸化，乙酰化等等，特定位点的修饰状况往往与蛋白的功能发挥直接挂钩，为了检测这些修饰，转录后修饰结构识别抗体则成为了现代蛋白功能组学、表观遗传学所需的必备材料。

艾柏森生物结合多年的小分子半抗原抗体制备经验，结合多肽设计合成技术优势发展了一整套的转录后修饰结构抗体制备技术路线。我们不仅能制备可反映全蛋白组环境（例如某种组织或者细胞的全裂解液）某一修饰基团的表达水平的修饰基团识别抗体，还能够制备专一性识别蛋白特定位置修饰情况的抗体。

服务组合

服务项目(Service Items)		周期（月）Time (months)	客户提供(Start point)
服务项目(Service Items)		周期（月）Time (months)	磷酸基 Phosphate specific	糖基化 Glycosylation specific	甲基 Methyl specific	乙基化 acetyl specific	纯化蛋白 purified protein	真核蛋白从头制备 Eukaryotic proteins synthesis de novo
多肽设计与合成 Peptide design & synthesis	多肽设计 Peptide design	0.5	可选，免费
	多肽合成 Peptide synthesis		√		√
	小分子或多肽偶联 conjugation		√	√	√
蛋白制备proteins preparation	cDNA合成 cDNA synthesis	1
	载体构建 Vector construction
	蛋白表达与纯化 Protein expression & purification
免疫阶段Immunization	免疫小鼠（3~5只） Immunized 3~5 mice	1.5	√	√	√	√	√	√
	ELISA检测 Elisa detection	1.5	√	√	√	√	√	√
细胞融合与筛选 Fusion & Screening			1.5	√	√	√	√	√
亚克隆阶段 subcloning		0.5	√	√	√	√	√	√
单克隆阶段（位点特异性负筛）monocloning (modification point specific negative screening)		1	√	√	√	√	√	√
腹水生产（5只小鼠） Ascites production (Injection on 5 mice)		1	√	√	√	√	√	√
纯化与检测 Purification and detection	亲和纯化 Affinity purification	0.5	√	√	√	√	√	√
纯化与检测 Purification and detection	特异性亲和纯化 Antigen specific affinity purification	0.5
总周期（月） Total lead time(months)			3.5~5.5				~3	4~6

注：

1）特定位点转录后甲基化、乙酰化以及部分糖基化修饰特异性抗体制备，如果要求极高的专一性，必须是单抗，多抗方案很难实现，多抗方案目前只能用于检测全蛋白整体修饰变化情况；

2）目前特定修饰类型抗体制备的难度，甲基化位点特异性识别抗体最高，乙酰化识别抗体次之，磷酸化识别抗体较为成熟，糖基化识别抗体受糖链的大小，位置影响较大；

3）由于修饰位点作为半抗原其免疫原性较弱，所以试验存在一定风险，实验开始前预收项目总费用的60%，若实验失败，预收费用不退。

经典案例（磷酸化抗体制备 Phosphate specific antibody service）

客户：提供蛋白信息

制备流程：

1、免疫及筛选用，特异性修饰多肽设计合成

2、饲养、免疫两只兔子/抗原（免疫三次3周）

3、取血、Elisa检测（与免疫同步进行）

4、纯化检测

交货交付产品（每种抗原、2只兔子一共的）

1）3~5mL阴性血清

2）15~20mL阳性血清，ELISA效价一般在1:60,000以上

3）完整的多肽合成质检报告，抗体纯化实验报告、剩余的抗原。

制备时间：约21天

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