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兔子单克隆抗体制备

服务号:

ABF5016

目录价:

¥0.00

服务周期:

服务分类:

单克隆抗体制备

限于专利技术保护的原因,目前全球兔单克隆杂交瘤细胞制备技术被一家公司垄断,所以我们无法通过像类似制备小鼠单克隆抗体那样,制备兔源杂交瘤细胞获得兔源单克隆抗体。为此,公司在一大批免疫学与基因工程学专家的帮助下,先后建立了两套兔源单克隆抗体制备方案。这两种方案均不依赖于兔源骨髓瘤细胞,但是其抗体的种源特性毫无疑问是兔源,在保留兔源单克隆抗体优势的同时,大大压缩试验周期,提高试验成功率。

服务组合

服务项目

(Service Items)

周期(周)

Time(weeks)

方案一:

噬菌体展示技术

(phage Display)

方案二:

异源表达重组技术

(Heterogeneous Recombination)

多肽peptide

小分子    

Molecular

磷酸基/甲基/

乙基化多肽

Phosphate/Methyl/

acetyl-specific

目前只有针对部分肿瘤相关通路热点分子的抗原,详情请与公司技术人员沟通

多肽设计与合成

Peptide design & synthesis

多肽设计     

Peptide design

~2

可选,免费

多肽合成   

 Peptide synthesis






小分子或多肽偶联  

conjugation




免疫阶段

Immunization

免疫2只兔子

Immunized 2 rabbits

~8

ELISA检测 

  Elisa detection

cDNA制备

cDNA preparation

逆转录制备cDNA文库

prepare cDNA liberary by RT-PCR

~1

cDNA文库质检

cDNA liberary QC check

构建Fab抗体库

Fab liberary construction

VH与VL基因获得

 obtained VHand VLgenes

10~15

构建初级抗体库 

primary antibody liberary construction

构建Fab抗体库

Fab liberary construction

噬菌体筛选

phage screening

噬菌体颗粒包装

 phage particles package

10~15


磁珠亲和筛选

magnetic beeds affinity screening


阳性克隆回收基因测序
Recover positive clones and DNA sequencing


抗体表达

Antibody expression

特异性双链基因合成与Fc基因桥接 

 synthetic of target phage gene and Fc gene

~5

构建真核表达载体

Eukaryotic system expression plasmids construction

真核表达

Eukaryotic system expression


稳转细胞系构建 
Stably transfected cell line construction







纯化与检测

Purification and detection

标签纯化 

Lable tag affinity purification

~1




特异性亲和纯化

Antigen specific affinity purification




总周期(月)

Total lead time(months)

7~9

3~5

注:

1)     价格面议;

2)     请慎重考虑周期事宜,以上时间仅为理想条件下最短周期;

3)     为了缩短试验周期建议考虑自行提供抗原直接免疫做起;

4)     免疫环节设立第一各验收节点,效价合格,取脾脏,效价不合格,终止实验;

5)     抗体库构建步骤启动之前,至少支付此步骤的50%全款;完成项目,支付尾款。

经典案例(Rabbit Monoclonal Recombination Antibody Service)

客户:提供抗原蛋白信息

制备流程:

1)抗原制备\质粒表达蛋白纯化\多肽设计合成及交联

2)免疫仓鼠:首次免疫兔子2只,失败后又加免了3只

3)ELISA/Western-blot试验监控小鼠血清中的抗体效价和特异性,根据ELISA和WB检测,筛选兔子

4)cDNA文库制备与噬菌体载体构建

5)磁珠链霉素亲和筛选

6)阳性克隆测序与基因合成桥接

7)真核表达质粒构建

8)稳转细胞构建

9)试表达鉴定与结果交付

交付产品(每种抗原、5只仓鼠一共的)

1)1株针对免疫原特异性的单克隆杂交瘤细胞株

2)1ml(浓度约0.1~1mg/ml)纯化的抗体,Elisa效价应至少1:200以上;制备时间:3~6个月


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