大肠杆菌表达系统蛋白表达纯化

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服务号：

ABF4000

目录价：

￥3500.00

服务周期：

2-3周

服务分类：

细菌系统蛋白表达纯化

大肠杆菌蛋白表达系统（Protein Expression in Bacteria）

大肠杆菌表达系统简介

1. 代谢途径和基因表达调控机制比较清楚

1) 全基因组测序，共有4405个开放性阅读框架；

2) 基因克隆表达系统成熟完善

3) 繁殖迅速，培养简单，操作方便，遗传稳定

2. 培养周期短

1) 大肠杆菌繁殖能力强，在营养条件充足时，20~30mins即可繁殖一代；

2) 大规模发酵成本低，具有巨大的生存潜力。

3. 目标基因表达水平高

表达水平较一般真核表达系统高，某些外源基因在大肠杆菌中的表达量可达总蛋白的5%~30%。

4. 遗传背景清楚

1) 对大肠杆菌的遗传背景和生理特性研究相当清楚，已有多种不同的抗药性、不同营养缺陷型和不同校正突变型的菌株供选择使用；

2) 可以根据不同的载体而选择不同的菌株。

5. 抗污染能力强，下游工艺简单，易于控制。

6. 已有大量可供选择利用的表达载体，被美国FDA批准为安全的基因工程受体菌。

艾柏森生物大肠杆菌表达系统优势

1. 艾柏森生物大肠杆菌可溶性表达成功率高达95%；

2. 艾柏森生物可以提供多种大肠杆菌表达载体，pET28b、pET22b、pGEX-6P-1等。

3. 多种大肠杆菌表达宿主，标准表达菌株BL21，可增强表达蛋白的菌株T7E，表达毒性蛋白的C41，增强蛋白可溶性表达的超低温菌株Arctic，以及其他经过艾柏森生物分子技术团队改造过的表达菌株，可以满足客户的不同需求。

4. 表达系统的优化。通过对表达系统进行优化，很大程度上解决蛋白不表达和包涵体的问题，如表达载体与表达菌株相容性测试、诱导表达条件的优化、复性等。

服务组合

服务项目(Service Items)	周期（周）Time(weeks)
蛋白分析与密码子优化	项目开始前完成
基因合成	2~4
载体构建	1
基因表达纯化测试	2
1L发酵表达及纯化	2
切标签	2
大规模的发酵与纯化	以项目需要为准
总计	8~10

注：

1）表达纯化测试一般包括2种载体，3种表达菌株，2个表达温度，12个条件的测试，根据客户的前期实验结果，有可能调整或缩短试验周期；

2）我们可提供的备选优化条件如下：

表达载体	pET28b\pET32a\pGEX-6p-1\pET22b\pBAD\pTrcHis等
表达菌株	Arctic\BL21(DE3)\Origami\Rosetta\T7 Expresss
表达温度	16℃\30℃\37℃

服务价格

4.1.1 大肠杆菌表达系统蛋白表达纯化ABF4000
	服务项目名称		服务编号
	大肠杆菌表达系统标准服务		ABF4000
步骤	服务内容	服务描述	价格（RMB）	周期
1	密码子优化，基因合成	针对蛋白信息，技术人员进行结构预测分析，风险评估，方案制作；采用三密码子或多样三密码子规则，优化密码子序列，验证蛋白的序列氨基酸种类和比例，并进行基因合成，避免移码突变。	1.50/bp	2~3周
2	亚克隆	利用PCR、胶回收、等技术手段将目的蛋白的基因导入适合载体中，构建稳定质粒	500	3~5天
3	表达纯化测试（9~12种条件）	将质粒转染载体；并尝试并调整表达条件（包括温度、表达时长、表达体系、诱导剂浓度等条件）；择最优条件进行100ml少量蛋白表达	1000	3~5天
4	1L发酵纯化	以上述恰当条件以及客户对蛋白表达量的需求，发酵罐大量表达蛋白	2000	3~5天
5	干冰运输样品	免费干冰运输	0
	实验报告	可根据客户需求定制蛋白质量检测等额外服务；服务项目整体细节均可提供。	0	1天
	合计		3500（不含基因合成费用）	12~19天
备注	如果客户提供质粒；可从表达纯测试开始做

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选择	品牌	货号	服务名称	服务周期	分类	服务数量	售价	操作
1	基因测序平台	ABF4006	富含二硫键蛋白的原核表达服务		细菌系统蛋白表达纯化		￥0.00	订购询价

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